Triple-Zucker Eisen-Test auf Bakterien zu finden-out die Fähigkeit, Schwefelwasserstoff zu produzieren (mit

Triple-Zucker Eisen-Test auf Bakterien zu finden-out die Fähigkeit, Schwefelwasserstoff zu produzieren (mit

Lesen Sie diesen Artikel über den Dreifachzucker Eisen Test auf Bakterien zu lernen, die Fähigkeit zu finden-out Schwefelwasserstoff zu produzieren!

Ziel verdreifachen Zucker Eisen-Test (TSI-Test) durchführen, die Fähigkeit eines Bakteriums, um herauszufinden, die eines oder mehrere der drei Zucker zu verwenden, wie zum Beispiel Glucose, Saccharose und Lactose sowie seine Fähigkeit, Schwefelwasserstoff (H 2 S zu erzeugen, ), das Eisen reduziert.

Einige Bakterien haben die Fähigkeit, eine oder mehrere der drei Zucker zu verwenden, wie zum Beispiel Glucose, Saccharose und Lactose.

Wenn einer oder mehrere der drei Zucker (triple Zucker) verwendet werden, wird Säure produziert, die den pH-Wert reduziert auf gelb die Farbe von Phenolrot von rot zu ändern.

Darüber hinaus haben einige Bakterien die Fähigkeit, Schwefelwasserstoff (H 2 S) durch die Verwendung von Schwefelverbindungen herzustellen. Die H2-S so hergestellten kombiniert mit der Eisenverbindung, Eisensulfat, schwarze Niederschläge von Eisensulfid zu bilden.

In der Dreifachzucker Eisen-Test (TSI-Test), wird die Testbakterien auf Schrägagar gezüchtet, die Glucose, Saccharose, Lactose, Phenolrot, Natriumthiosulfatlösung und Eisensulfat. Während das Medium Glucose enthält (d.h. D-Glucose oder Dextrose) bei einer niedrigen Konzentration von 0,1%, wird die Konzentration der Sucrose und Lactose hoch bei 1% gehalten.

Wenn die Bakterien die Fähigkeit haben, eines oder mehrere der drei Zucker, Farbe des Mediums von rot zu gelb zu verwenden. Wenn die Bakterien, die die Fähigkeit zur Produktion von H 2 S haben, erhält das Medium eine schwarze Farbe. Als drei Zucker und eine Eisenverbindung in dem Medium verwendet werden, wird der Test Dreifachzucker Eisen-Test genannt.

Benötigte Materialien:

Reagenzgläser, Erlenmeyerkolben, Baumwollstopfen, Impfnadel, Autoklaven, Bunsenbrenner, Laminar-Flow-Kammer, entsorgen Glas, Inkubator, Dreier- Zucker Eisen (TSI) Agar, isolierte Kolonien oder reine Kulturen von Bakterien.

1. Die Bestandteile von TSI-Agar-Medium (mit den 3 Zucker und Eisen als Hauptkomponenten) oder deren fertige Pulver für 100 ml des Mediums erforderlich ist, in 100 ml destilliertem Wasser in einem 250 ml Erlenmeyerkolben eingewogen und gelöst, indem Schütteln und Schwenken (Abbildung 7.7).

2. Der pH-Wert wird bestimmt mit einem pH-Papier oder pH-Meter und auf 7,4 eingestellt unter Verwendung von 0,1 N HCI, wenn es mehr oder 0,1 N NaOH zu verwenden, wenn es weniger ist.

3. Der Kolben wird erhitzt, um den Agar im Medium vollständig zu lösen.

4. Bevor es ist, das Medium in warmen geschmolzenen Zustand verfestigt sich verteilt in fünf Teströhrchen (etwa je 20 ml).

5. Die Teströhrchen sind Baumwolle gesteckt, mit Handwerk Papier überzogen und mit Faden oder Gummiband gebunden.

6. Sie werden bei 121 ° C (15 psi Druck) 15 Minuten lang in einem Autoklaven sterilisiert.

7. Nach der Sterilisation werden sie aus dem Autoklaven entfernt und in einer Schräglage um das Medium zu kühlen und zu verfestigen, so wie TSI-Agar-Schrägkulturen zu erhalten.

8. Die Testbakterien beimpft wird aseptisch, vorzugsweise in einem laminaren Strömungskammer, in die Schrägen durch Tauchen in die Stoß stechend und Ausstreichen auf der Oberfläche der Schrägen mit Hilfe eines Flamm- sterilisierten Nadel. Die Nadel wird nach jeder Inokulation sterilisiert.

9. Die inokulierten Schrägen werden 24 Stunden bei 37 ° C inkubiert in einem Inkubator.

1. Gelb Hintern und rote Schräge mit oder ohne Gasproduktion (Brüche im Agar Po):

Saurer Hintern und alkalische Schräge gebildet wurde. Hier nur Glukose wurde anaerob (fermentativ) macht den Hintern sauer (gelb) verwendet. Kein anderer Zucker wurde verwendet. Da Glucose-Konzentration geringer (0,1%), wird die kleine Menge der Säure auf der schrägen Fläche erzeugt schnell oxidiert sie alkalisch (rot) zu machen.

Ferner erzeugt oxidative Dominanz von Pepton im Medium vorhandenen NHJ, die die Neigung alkalisch (rot) macht. Doch in den Hintern wird die Säure Zustand aufgrund der geringeren Verfügbarkeit von Sauerstoff gehalten und ein langsameres Wachstum der Bakterien. Somit ist die Bakterien positive Glukose.

2. Gelb Hintern und gelbe Schräge mit oder ohne Gasproduktion:

Säure Hintern und Säure Schräge gebildet wurde. Hier, Lactose und / oder Saccharose fermentiert wurden. Da ihre Konzentration im Medium hoch ist, produzieren sie große Mengen an Säuren in sauren Neigung und sauren Hintern resultierende und den sauren Zustand zu erhalten. Somit ist die Bakterien Saccharose / Lactose positiv.

3. Red Butt und rote Neigung:

Keines der drei Zucker wurde fermentiert. Stattdessen wurden unter anaeroben und / oder aeroben Bedingungen, was zu einem alkalischen Bedingungen aufgrund der Produktion von Ammoniak Peptone katabolisiert.

Wenn nur aeroben Abbau von Peptonen auftritt, nur die schräge Fläche wird alkalisch (rot). Wenn es aeroben und anaeroben Abbau ist Pepton, sowohl die Neigung als auch der Hintern wird alkalisch (rot). Somit ist die Bakterien Zucker negativ.

4. Schwärzung des Po:

Zusätzlich zu einem der oben genannten Bedingungen, wenn der Stumpf Schwärzung auftritt, zeigt dies an, dass die Bakterien zur Herstellung von H2 S unter Verwendung des anorganischen Schwefels (Natriumthiosulfat) in dem Medium fähig ist.

Die H2 S verbindet sich mit dem Eisensulfat in dem Medium in einer Änderung in der schwarzen Farbe des Mediums resultierende schwarze Niederschlag von Eisensulfid zu bilden. Somit sind die Bakterien H2 S positiv.

5. Keine Schwärzung Hintern:

Die Bakterien nicht in der Lage H2 S zur Herstellung des anorganischen Schwefels (Natriumthiosulfat), die in dem Medium verwendet wird. Somit ist die Bakterien negativ H2 S.

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